羊的人工授精技術及操作要點

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人工授精技術包括器械的消毒、采精、精液品質檢查、精液的稀釋、保存和運輸、母羊發情鑑定和輸精等主要技術環節。

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1 消毒技術

1.1 器械的消毒

采精、輸精及與精液接觸的所有器械都要消毒,並保持清潔、乾燥,存放在清潔的櫃內或烘乾箱中備用。假陰道要用2%的碳酸氫鈉溶液清洗,再用清水沖洗數次,然後用75%的酒精消毒,使用前用生理鹽水沖洗。集精瓶、輸精器、玻璃棒和存放稀釋液及生理鹽水的玻璃器皿洗凈後要經過30分鐘的蒸氣消毒,使用前用生理鹽水沖洗數次。金屬製品如開膣器、鑷子、盤子等,用2%的碳酸氫鈉溶液清洗,再用清水沖洗數次,擦乾後用75%的酒精或進行酒精燈火焰消毒。

1.2 場地的消毒

準備一間向陽、乾淨的配種無菌室,要求地面平整,光線充足,面積為10~12平方米,室溫為18℃~25℃。也可選擇寬敞、平坦、清潔、安靜的室外場所。日常消毒用1%新潔爾滅或1%高錳酸鉀溶液進行噴灑消毒,每日於采精前和采精後各進行1次。每星期對采精室進行1次熏蒸消毒,所用藥品是40%的甲醛溶液500毫升,高錳酸鉀250克。

1.3 羊體的消毒

公羊實施配種前和情期母羊實施配種前,用1%新潔爾滅溶液對羊體進行反覆消毒。

1.4 消毒應注意的問題

嚴格遵守消毒時間和消毒藥品的配量要求;熏蒸消毒時,應關閉門窗,第2天應提前1小時到崗,敞開門窗;注意安全,防止物品損壞,每次消毒完畢,應及時關掉電源。

2 采精技術

2.1 采精前的準備

2.1.1 器械的準備:所有的器械都要提前清洗、乾燥、消毒,存放於消毒櫃內備用。

2.1.2 公羊的準備:種公羊第一次采精時的年齡應在1.5歲左右,不宜過肥,也不宜過瘦,初次參加采精的公羊,應先進行采精訓練,方法是讓其"觀摩"其他公羊配種;或用發情母羊的尿液或分泌物塗抹在公羊鼻尖上,刺激性慾。采精調教訓練成功後,才能進行正式操作。

2.1.3 假陰道的安裝:安裝假陰道時,先將內胎裝入假陰道外殼,再裝上集精瓶,注意內胎平整,不要出現皺褶。為保證假陰道有一定的潤滑度,用清潔玻璃棒蘸少許滅菌凡士林,均勻塗抹在假陰道內胎和前三分之一處。為使假陰道溫度接近母羊溫度,從假陰道注水孔注入少量溫水,使水約占內外胎空間的70%,假陰道溫度在采精時應保持在40℃~42℃。注水後,再通過氣體活塞吹入氣體,使假陰道保持一定彈性,吹入氣體的量一般以內胎表面呈三角形合攏而不向外鼓出為適宜。

2.2 采精

采精前用溫水洗種公羊陰莖的包皮,並擦乾淨。將台羊保定後,引公羊到台羊處,采精時采精員站立在公羊的右側,當種公羊爬跨時,迅速上前,右手持假陰道靠在母羊臀部,其角度與母羊的陰道的位置相一致(與地面成35~45度角),用左手輕托陰莖包皮,迅速將陰莖導入假陰道中。羊的射精速度很快,當發現公羊有向前沖的動作時即已射精,要迅速把裝有集精瓶的一端向下傾斜,並豎起集精瓶,送精液到處理室,放氣後取下集精瓶,蓋好蓋,並記錄公羊號,放於操作台上進行精液品質檢查。

2.3 采精頻率

成年種公羊每日采精1~2次,連採3天休息1次,初采羊可酌減。

2.4 采精注意事項

嚴格遵守消毒技術要求,所有采精物品未經消毒不得應用。采精訓練是一項細緻的工作,必須由采精熟練人員負責進行。所用采精器的環境條件必須嚴格把握,溫度要控製在40℃~42℃。

3 精液品質檢查

精液品質檢查的目的是為了評定精液品質的優劣,以便決定它能不能用於輸精配種,同時,也為確定精液的稀釋倍數提供科學依據。

3.1 外觀檢查

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3.1.1 顏色:正常的精液為濃厚的乳白色,肉眼可看到乳白色雲霧狀。

3.1.2 氣味:正常精液無味或略帶腥味。

3.1.3 精液量:公羊一次采精的精液量一般為0.5~2.0毫升,山羊平均為0.8~1.0毫升,綿羊平均為1.0~1.2毫升。

經外觀檢查,凡帶有腐敗臭味,出現紅色、褐色、綠色的精液判為劣質精液,應棄掉不用,一般情況下不再做顯微鏡檢查。

3.2 顯微鏡檢查

3.2.1 精子活率:精子的活率是指在38℃的室溫下直線前進的精子占總精子數的百分率。檢查時以滅菌玻璃棒蘸取1滴精液,放在載玻片上加蓋玻片,在400~600倍顯微鏡下觀察。全部精子都做直線運動評為1級,90%的精子做直線前進運動為0.9級,以下以此類推。

3.2.2 精子的密度:是指每毫升精液中所含的精子數。取1滴新鮮精液在顯微鏡下觀察,根據視野內精子多少分為密、中、稀三級。"密"是指在視野中精子的數量多,精子之間的距離小於1個精子的長度;"中"是指精子之間的距離大約等於1個精子的長度;"稀"為精子之間的距離大於1個精子的長度。為了精確計算精子的密度,可用血球計數器在顯微鏡下進行測定和計算,每毫升精液中含精子25億以上者為密,20億~25億個為中,20億以下為稀。

3.3 精子質量的評定標準

精液為乳白色,無味或略帶腥味,精子活力在0.6以上,密度在中等以上(每毫升精液的精子數在20億以上),畸性精子率不超過20%,該羊精液判為優質精液。以上幾項質量標準任何一項達不到要求,均被定為劣質精液。

3.4 精液檢查時應注意的問題

做顯微鏡檢查時,溫檢箱內溫度控製在38℃左右。精液品質檢查要求迅速準確,室內要清潔,室溫保持在18℃~25℃。精子的形態檢查,一般1周內對同1頭公羊精液做1次染色檢查,其他時間可根據經驗做直觀估測。

4 精液的稀釋、分裝、運輸和保存

4.1 精液的稀釋

精液稀釋的目的是擴大精液量,增加每次采精的可配母羊數,提高種公羊的利用率,還可供給精子營養,增強精子活力,有利於精液的保存、運輸和輸精。

4.1.1 稀釋液的配製:稀釋液的配方選擇易於抑製精子活動,減少能量消耗,延長精子壽命的弱酸性稀釋液。

配方一:生理鹽水稀釋液:是用注射用生理鹽水或經過過濾消毒的0.9%氯化鈉溶液作稀釋液。此種稀釋液簡單易行,稀釋後的精液應在短時間內使用,是目前生產實踐中最為常用的稀釋液。但用這種稀釋液稀釋時,稀釋的倍數不宜太高,一般以2倍以下為宜。

配方二:奶汁稀釋液:奶汁先用7層紗布過濾後,再煮沸消毒10~15分鐘,降至室溫,去掉表面脂肪即可。這種稀釋液稀釋效果好,但稀釋倍數不能太高,以3倍以下為宜。

配方三:葡萄糖卵黃稀釋液:在100毫升蒸餾水中加葡萄糖3克、檸檬酸鈉1.4克,溶解後過濾3~4次,蒸煮30分鐘後滅菌,降至室溫,再加新鮮卵黃(不要混入蛋白)20毫升,再加青黴素10萬單位振蕩溶解。這種稀釋液有增加營養的作用,可作7倍以下的稀釋。

4.1.2 精液的稀釋倍數:要根據精子密度、活力而定稀釋比例,稀釋後的精液,每毫升有效精子數不少於7億個。

4.1.3 精液稀釋的操作步驟:根據鏡檢得出精子密度確定稀釋倍數,根據稀釋倍數計算出應加入的稀釋液的量,用量杯量取應加的稀釋液量。稀釋前將兩種液體置於同一溫水中,然後將稀釋液沿著精液瓶緩緩倒入,為使混合均勻可稍加搖動或反覆倒動1~2次,稀釋完畢後,立即進行活力鏡檢,並將鏡檢結果填人采精登記表。

4.1.4 精液稀釋應注意的事項:稀釋液溫度與精液溫度保持一致,在20℃~25℃室溫和無菌條件下操作,精液稀釋的倍數應根據精子密度而定,一般為1~3倍,稀釋後的每毫升有效精子數不能低於7億個。

4.2 精液的分裝

將稀釋好的精液根據各輸精點的需要量分別裝於2~5毫升小試管中,精液面距試管口不少於0.5~1.0毫升,然後用玻璃紙和膠圈將試管口紮好,在室溫下自然降溫。分裝後貼上標籤,標籤上註明精液采出的日期、時間、活力、密度、公羊的品種。

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4.3 精液的運輸

在近距離運送精液時,不必進行降溫,將裝有精液的集精瓶或小試管口封嚴,用棉花包好放入保溫瓶中即可。遠距離運輸時,可用直接降溫法降溫。運輸精液時要防止劇烈震動,降溫或升溫都要緩慢進行,每次輸送的精液都要註明公羊號、采精時間、精液量和精液品質。

4.4 精液的保存

4.4.1 常溫保存:精液稀釋後,保存在20℃以下的室溫環境中。在這種條件下,精子運動明顯減弱,可在一定限度內延長精子存活時間。常溫保存只能保存1天。

4.4.2 低溫保存:在常溫保存的基礎上,溫度進一步緩慢降至0℃~5℃之間。可用直接降溫法,將精液裝入小試管內,外麵包以棉花,再裝入塑料袋內,直接放入裝有冰塊的廣口保溫瓶或保溫箱中,使溫度逐漸降至2℃~4℃。低溫下保存的有效時間為2~3天。

4.4.3 冷凍保存:精液的冷凍保存要求的技術、環境和設備條件較嚴格,操作過程也比較複雜,這裡不加詳述。

5 發情鑑定

適時配種是提高羊人工授精受胎率的關鍵措施之一,母羊發情的主要表現:食慾減退、興奮不安、嘶鳴、爬跨其他羊或接受其他羊爬跨而靜立不動;陰門紅腫,頻頻排尿而流出透明的黏液;用試情公羊與母羊接觸(隔著試情架),母羊表現溫馴,並將後軀轉向公羊,陰門腫脹;用陰道開膣器插入陰道,使之開張,發情盛期的母羊陰道潮紅、潤滑,子宮頸口開張,分泌的黏液呈豆花樣。

6 輸精

6.1 輸精前的準備

6.1.1 人員的準備:輸精人員應穿工作服,用肥皂水洗手擦乾,用75%酒精消毒後,再用生理鹽水沖洗。

6.1.2 輸精器械的準備:把洗滌好的開膣器、輸精槍、鑷子用紗布包好,一起用高壓鍋蒸汽消毒。

6.1.3 母羊的準備:對發情母羊進行鑑定及健康檢查後,才能輸精,母羊輸精前,應對外陰部進行清洗,以1/3000新潔爾滅溶液或酒精棉球進行擦拭消毒,待乾燥後再用生理鹽水棉球擦拭。

6.1.4 精液的準備:將精液置於35℃的溫水中升溫5~10分鐘後,輕輕搖勻,做顯微鏡檢查,達不到輸精要求的不能用於配種。

6.2 輸精方法

將用生理鹽水濕潤後的開膣器插入陰道深部觸及子宮頸後,稍向後拉,以使子宮頸處於正常位置之後輕輕轉動開膣器90度,打開開膣器,開張度在不影響觀察子宮的情況下開張的愈小愈好(2厘米),否則易引起母羊努責,不僅不易找到子宮頸,而且不利於深部輸精。輸精槍應慢慢插入到子宮頸內0.5~1.0厘米處,插入到位後應縮小開膣器開張度,並向外拉出1/3,然後將精液緩緩注入。輸精完畢後,讓羊保持原姿勢片刻,放開母羊,原地站立5~10分鐘,再將羊趕走。

6.3 輸精次數和輸精量

輸精次數:母羊1個情期應輸精2次,發現發情時輸精1次,間隔8~10個小時應進行第2次輸精。輸精量:每頭份的輸精量,原精液為0.05~0.10毫升,稀釋後精液應為0.1~0.2毫升。

6.4 輸精時應注意的問題

輸精人員要嚴格遵守操作規程,輸精員輸精時應切記做到深部、慢插、輕注、稍停。對個別陰道狹窄的青年母羊,開膣器無法充分打開,很難找到子宮頸口,可採用陰道內輸精,但輸精量需增加1倍。輸精後立即做好母羊配種記錄。每輸完一隻羊要對輸精器、開膣器及時清洗消毒後才能重複使用,有條件的建議用一次性器具。

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